Réactifs requis pour l'extraction d'ARN et leur rôle
Rôle de Bouillon Luria – Bertani
Lors de l'isolement et de l'extraction d'acides nucléiques de bactéries, qu'il s'agisse d'ARN bactérien total ou d'ADN, la préparation d'une culture fraîche est fortement recommandée et pour cela nous utilisons un milieu riche tel que le bouillon Lauria Bertani (LB)
Le bouillon LB est le milieu de croissance riche qui donne une bonne croissance rapide de nombreuses espèces bactériennes. Il s'agit du milieu de croissance le plus couramment utilisé pour la culture de cellules d'E.Coli pendant la plupart des études de biologie moléculaire. Le bouillon LB soutient la croissance d'E. Coli jusqu'à 2–3 à OD600 dans des conditions d'incubation sous agitation normales.
Rôle de EDTA dans l'extraction des acides nucléiques
Le tampon TE ou Tris EDTA peut être préparé en mélangeant du Tris 50 mM et de l'EDTA 50 mM dans de l'eau et en maintenant le pH à 8,0. En tant que constituant majeur du tampon TE, Tris agit comme un tampon de pH commun pour contrôler le pH lorsque d'autres réactifs sont ajoutés au cours des étapes suivantes.
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