Real Time PCR

PCR en temps reel

La PCR en temps réel (ou PCR quantitative en temps réel, qPCR) est une technique de PCR qui permet de suivre l'amplification génique en temps réel. Elle utilise un fluorochrome qui est lié à un sonde spécifique pour un gène cible, et un lecteur de fluorescence qui mesure l'augmentation de fluorescence au cours de l'amplification. Cette technique permet de détecter la présence d'une quantité très faible d'acide désoxyribonucléique (ADN) cible et de suivre l'augmentation de cette quantité au cours de l'amplification. Elle est utilisée dans de nombreux domaines, tels que la médecine, la biologie moléculaire, la recherche sur les maladies infectieuses et la biotechnologie.


Type des fluorochrome de PCR en temps réel 

Il existe de nombreux types de fluorochromes utilisés pour la PCR en temps réel. Les plus couramment utilisés sont :

La sybr green : c'est un agent de coloration de synthèse qui interagit avec tous les acides nucléiques, elle est donc utilisée pour détecter tous les types d'ADN et ARN.

Les sondes hydrolysables : Ces sondes sont spécifiques à une région ciblée, elles contiennent une région de reconnaissance spécifique qui se lie à une région spécifique de l'ADN ou de l'ARN cible, elles contiennent également une région hydrolysable qui est dégradée par une enzyme spécifique, ce qui entraîne une augmentation de la fluorescence. Les exemples les plus connus sont TaqMan, Molecular Beacon, Scorpions

Les sondes à hybridation : ces sondes contiennent une région de reconnaissance spécifique qui se lie à une région spécifique de l'ADN ou de l'ARN cible, mais ne contiennent pas de région hydrolysable, elles sont donc utilisées pour détecter une région spécifique de l'ADN ou de l'ARN cible.

Il est important de noter que les fluorochromes utilisés pour la PCR en temps réel doivent être choisis en fonction de l'application spécifique et de la sensibilité requise pour détecter la région cible.